本生闡述：細(xì)胞凍存管的使用步驟及常見(jiàn)問(wèn)題

　　凍存管一般用作實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞的低溫保藏。凍存管又名冷凍管，是常用的實(shí)驗(yàn)耗材，多用于生物、醫(yī)藥、食品等行業(yè)。

　　凍存管介紹：

　　凍存管一般按容量劃分為0.5ml，1.0ml，1.5ml，1.8ml，2.0ml，4ml，5ml，7ml，10ml等。一般的凍存管不能進(jìn)入液氮里，只有特殊材料處理的才可以放入。同時(shí)凍存管還有雙層的和無(wú)雙層的帶硅膠墊和沒(méi)有硅膠墊的等種種，還有無(wú)色和雜色及各種純色等不同。如果需要進(jìn)入液氮保藏的就要選擇密封的耐低溫的專(zhuān)用凍存管，還要認(rèn)清所購(gòu)買(mǎi)的凍存管是否是無(wú)菌以及無(wú)DNA,RNA。

　　凍存管的使用步驟：

　　⑴ 從細(xì)菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥?zhǔn)媳葷岫鹊木鷳乙航臃N與菌種保存管中。

　?、?擰緊保存管，來(lái)回顛倒4-5次使細(xì)菌乳化，不能旋搖。

　?、?把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)

　　凍存管的常見(jiàn)問(wèn)題：

　　1、問(wèn)：Nunc凍存管可以滅菌嗎?

　　答：雖然凍存管使用聚yixi材料制造，但是我們不推薦客戶滅菌。

　　2、問(wèn)：凍存管內(nèi)旋蓋和外旋蓋有什么區(qū)別?

　　答：內(nèi)旋凍存管為氣相液氮?dú)庀嘀袃龃鏄悠范O(shè)計(jì)，管口硅膠墊增強(qiáng)了凍存管的密封性;外旋凍存管為機(jī)械設(shè)備如冰箱中凍存樣品而設(shè)計(jì)，外旋蓋的螺紋蓋可以降低處理樣品時(shí)的污染幾率。

　　3、問(wèn)：Nunc的凍存管可以浸入液氮(液相)中凍存樣品嗎?

　　答：Nunc的內(nèi)旋凍存管可以在液氮中儲(chǔ)存，由于硅膠墊增強(qiáng)密封性。但超低溫度下，任何的密封材料都變得異常脆弱，理論上只要是機(jī)械密封就存在泄漏的危險(xiǎn)，為了防止泄漏產(chǎn)品的危險(xiǎn)，機(jī)械密封的凍存管必須密封在保護(hù)袋中。Nunc提供CryoFlex 密封管，熱密封的聚yixi管專(zhuān)門(mén)為Nunc凍存管密封設(shè)計(jì)。將凍存管在液氮液相中凍存而沒(méi)有使用CryoFlex 密封管是十分危險(xiǎn)的，凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進(jìn)行熱密封。

　　4、問(wèn)：當(dāng)凍存管儲(chǔ)存在液氮液相中而沒(méi)有使用CryoFlex Tubing 時(shí)，如何正確的溶解復(fù)蘇細(xì)胞?

　　答：在整個(gè)操作過(guò)程中必須穿戴保護(hù)服，包括手套，臉罩等。凍存管從液氮液相取出后必須在液氮?dú)庀嘀袃?chǔ)存24h，這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸，從而降低凍存管中的壓力。等在液氮?dú)庀鄡?chǔ)存24h后，將凍存管放入水浴槽，同時(shí)用毛巾覆蓋，等熔融復(fù)蘇結(jié)束后轉(zhuǎn)移凍存物。

　　5、問(wèn)：使用CryoFlex 密封管時(shí)需要熱密封，這會(huì)不會(huì)影響細(xì)胞活性?

　　答：將樣品加入凍存管以前需要將凍存管置于4℃ 冰浴槽。

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